技術文章
Technical articles小鼠腦微血管內皮細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發(fā)育（右側已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用75%的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預熱；③超凈臺臺面...
小鼠骨髓內皮祖細胞來源內皮祖細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。小鼠骨髓來源內皮祖細胞采用沖洗骨髓、...
通過大量的小鼠神經(jīng)元細胞培養(yǎng)，積累了豐富的培養(yǎng)經(jīng)驗，以及對于其中的難點有了自己的一些見解。小鼠神經(jīng)元的大小并不能一概而論，應該說每個腦區(qū)的神經(jīng)元大小均不一致，就是每個核團的神經(jīng)元大小也不相同，大神經(jīng)元直徑長軸有30-40um，短軸20-25um，中型神經(jīng)元應該是長軸20-30um，短軸15左右，小神經(jīng)元長軸10-20um，短軸8um左右。做冰凍切片的并不需要每個神經(jīng)元都觀察，而是觀察每個神經(jīng)核團即可，因此取片應該隔二取一或者隔三取二均可。神經(jīng)元的分離可以選用密度梯度離心的方法...
癌細胞株(CellStrain)是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后即為細胞系(cellline)，由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限，可稱為有限細胞系(finitecellline)，如可以連續(xù)培養(yǎng)，則稱為連續(xù)細胞系(continuouscellline)，培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細...
一、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育與神經(jīng)干細胞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育起始于胚胎早期的神經(jīng)管和神經(jīng)嵴，其中央管在發(fā)育的終末形成腦室系統(tǒng)和脊髓的中央管，管腔內面被覆的細胞為神經(jīng)上皮(neuroepithelium)，具有活躍的增殖和分化能力，在胚胎早期此區(qū)域稱為腦室／腦室下區(qū)(ventricular/subventricularzone，VZ／SVZ)，而在成年后則稱為室管膜／室管膜下區(qū)(ependymal/subepen-dymalzone，EZ／SEZ)，在神經(jīng)發(fā)生(neurogenesis)過程中起...
小鼠結腸上皮細胞原代細胞帖壁原代細胞(primarycell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞，稱為原代細胞。一般認為，培養(yǎng)的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代，進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。細胞株(cellstrain)是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)細胞中獲得具有特殊性質或標志物的細胞稱為細...
大鼠肝微粒體是肝、腸、腎等器官經(jīng)過差速離心制備的亞細胞成分，是細胞器內質網(wǎng)一部分，該部分表達有種類多樣的蛋白質。特別是肝微粒體，具有完整的I相代謝酶（如細胞色素P450、黃素單加氧酶、單胺氧化酶等），II相代謝酶（如葡萄糖醛酸轉移酶，硫酸基轉移酶）、酯酶等。肝微粒體能體現(xiàn)絕大部分人體內藥物代謝的情況，是FDA指導原則的預測人體內代謝及抑制試驗的研究工具。肝微粒體和細胞漿定制服務具有以下優(yōu)勢：一、具有多年肝S9、肝微粒體和細胞漿分離提純經(jīng)驗，技術路線成熟可靠；二、定制服務周期短...
大鼠肝S9是大鼠肝實質細胞勻漿液的去線粒體上清液，包含了大量的CYPs等藥物代謝酶，其在藥物體外代謝的研究中具有快速簡便、靈敏、經(jīng)濟且可進行高通量篩選的特點，因此常用作體外研究藥物代謝和藥物相互作用的工具。許多致癌劑的生物轉化是依靠細胞內微粒體混合功能氧化酶系來完成的，所以肝S9是許多體外研究致癌劑生物轉化的活化系統(tǒng)。傳統(tǒng)的肝S9誘導劑為多氯聯(lián)苯，其誘導效果比單獨用β-奈黃酮要好，但其是致癌劑，一種嚴重的環(huán)境污染物，現(xiàn)許多國家已禁止生產(chǎn)。現(xiàn)研究表明聯(lián)合誘導法可以達到多氯聯(lián)苯誘...
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