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當前位置:首頁新聞中心小鼠主動脈內皮細胞適用于各種組織的原代培養

小鼠主動脈內皮細胞適用于各種組織的原代培養

更新時間:2020-04-22點擊次數:1842
  小鼠主動脈內皮細胞是從供體中取得組織或細胞后在體外進行的培養,原代培養不僅是建立各種細胞系的開始,也是從事組織或細胞培養工作人員應熟悉和掌握的基本的技術。
  原代培養的組織或者細胞的生物學特性沒有發生很大變化,仍具有二倍體遺傳物質,接近和反映體內生長特性,很適合作藥物測試、基因表達測試、細胞分化等實驗研究。原代培養是獲取細胞的主要手段,但原代培養的組織由多種成分組成,比較復雜,即使同一類型細胞如成纖維樣細胞或上皮樣細胞,細胞間也存在很大差異。如果供體不同,即使組織類型、部位相同,個體差別也可以在細胞上反映出來。
  因而原代細胞的部分生物學特征尚不穩定,如要做較為嚴格的對比性實驗研究,還需要對原代培養的細胞進行短期傳代后再進行(需要注意的是有些細胞在傳代后可能會發生一些生物學特性的變化)。一般采用2-5代的細胞進行實驗。當然特殊情況和一些終端分化細胞如神經細胞、巨噬細胞、心肌細胞除外。小鼠主動脈內皮細胞原代培養的方法很多,基本和常用的為組織塊原代培養法和離散細胞原代培養法(消化法)。
  小鼠主動脈內皮細胞培養法是原代細胞培養常用的基本方法,適用于各種組織的原代培養,特別是難以消化的組織,組織塊原代培養法操作程序簡單,培養前不經過酶液處理,細胞損傷較小。但由于培養過程中細胞移動受到較大限制,完成原代培養所需的時間較長。
   細胞培養的程序一般為:
  1.組織塊修整:將組織塊用平衡緩沖液反復沖洗,然后在滅菌的培養皿中剪碎至碎塊的直徑小于1mm。
  2.貼壁:將組織塊間隔(小塊之間的間隔為1cm)放在培養皿中,培養基需要浸沒組織塊底部但不能使組織塊浮起。
  3.培養:通過生長繁殖,細胞可以從組織塊邊緣向四周游出,生長繁殖連成片,原組織塊可以*消失。
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