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小鼠骨髓間充質干細胞能更好地發揮作用

更新時間:2020-05-13點擊次數:1758
  小鼠骨髓間充質干細胞的分離方法有全骨髓法和密度梯度離心法,全骨髓法即根據干細胞貼壁特性,定期換液除去不貼壁細胞,從而達到純化MSC的目的。密度梯度離心法即根據骨髓中細胞成分比重的不同,提取單核細胞進行貼壁培養。
  分離培養結果的差異可能是由于各個研究小組標本來源、采用的分離方法不同從而所獲得的細胞不同,或者用來檢測的細胞代數不同,或者培養過程中用的胎牛血清不同,導致MSCs獲得或失去這些表面標記物的表達。
  小鼠骨髓間充質干細胞的培養一定要用塑料培養瓶,不能用玻璃的。因為象間質干這類的基質細胞不易貼玻璃,而且現在買的培養瓶都涂有一層促細胞貼壁的物質,而且隨著細胞的擴增,端粒的長度不變,單個MAPC來源的細胞群不僅能在體外向3個胚層的細胞分化,而且能在體內能夠向各種組織細胞分化,相比較而言,形態與MSC相似的體外培養的皮膚成纖維細胞則不具有類似的分化潛能。
  原代分離的間充質干細胞在接種后培養24小時,細胞開始貼壁,胞體呈圓形或多邊形,培養第3-5天,細胞開始較緊密貼附壁上并開始有細胞呈梭形,并不斷長大、變長,但未觀察到細胞分裂,隨著細胞數的增加,細胞的生長速度變快,逐漸成漩渦狀排列,培養第12天貼壁細胞長滿瓶底的80%,并融合成片。采用貼壁培養法可獲得足夠數量、生長狀態良好、增殖能力強的間充質干細胞,隨傳代數增加,其純度增加,且該方法簡單、實用。
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